L'ensemencement doit être massif, en stries serrées ou par inondation

                Ce milieu contient un inhibiteur :  fortes concentrations en chlorure de sodium (75 g.L^-1),  ce qui permet un isolement sélectif de Staphylococcus  tolérant les fortes concentrations en Na Cl

                On peut étudier la fermentation du mannitol par virage au jaune de l’indicateur coloré, le rouge de phénol, autour des colonies.

                Les colonies mannitol + sont entourées d’une auréole jaune.

                Ne pas confondre la pigmentation des colonies et le virage de l’indicateur coloré.

                Ainsi des colonies pigmentées en jaunes et mannitol + :  forte suspicion de S. aureus

Deux indicateurs sont présents dans le milieu :

                - le bleu de bromothymol (indicateur de pH)

                - la fuschine acide (qui se colore en présence d'aldéhyde.

                ü trois types de glucides : la salicine (qui est un hétéroside), le saccharose et le lactose.

                ü La production d'H₂S à partir de thiosulfate

                ü Colonies saumon : Escherichia, Levinea, Citrobacter diversus, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Yersinia

                ü Colonies saumon à centre noir : Citrobacter freundii, Proteus vulgaris,

                ü Colonies bleu-vert à centre noir : Suspicion de Salmonella, à différencier de Proteus mirabilis

                ü Colonies bleu-vert ou vertes : Suspicion de Shigella ou de Salmonella

                Isolement par la méthode des cadrans.

                In cuber 18 à 24 h à 37°C.

Le milieu contient 3 inhibiteurs :

                - sels biliaires,

                - vert brillant

                - forte concentration en citrate de sodium.

                Ceux-ci empêchent la pousse de toutes bactéries Gram⁺, et rendent difficile la croissance des bactéries Gram^- autres que Salmonella et Shigella.

                ü Le milieu contient du lactose pouvant être fermenté.

                ü Le milieu contient du thiosulfate pouvant donner du H₂S.

               ü colonies rouges : lactose +

                ü colonies incolores : lactose –

                ü colonies à centre noir : H2S +

                ü colonies violettes : semi-bombées de 2 à 3mm de diamètre avec éclat métallique, centre sombre : E. coli très bombées muqueuses de diamètre 5 mm centra gris marron sans reflet Klebsiella

                ü colonies grisâtres :

- 1 à 2 mm de diamètre transparentes, grises ambrées : Salmonella, Shigella.

- 2 mm de diamètre, grisâtres avec une pellicule autour de la colonie : Proteus morganii

                üpunctiformes et grisâtres : Enterococcus.

                Isolement par la méthode des cadrans.

                Incuber 18 à 24 h à 37 °C.

Ce milieu contient deux inhibiteurs de la flore Gram⁺ :

                - les sels biliaires

                - le cristal violet

                colonies rouges entourées d’un hâlo opaque de la même couleur du à la précipitation des sels biliaires: lactose⁺

colonies jaunes ou incolores : lactose^-

                lactose + apparaissent jaunes

                lactose – apparaissent bleues vertes

                Isolement

                18 à 24 h à 37°C

- Non selectif

- Dépourvu en électrolyte

- Bromocrésol pourpre

                - Espèces n’appartenant pas aux entérobactéries

                - Fermentation du lactose

                üColonies bleues : bactéries lactose –

                ü Colonies jaunes : bactéries lactose +

                Isolement

                18 à 24 h à 37°C

                Il contient 2 inhibiteurs :

ü le chlorure de lithium

ü  et le tellurite de potassium.

                Contient 3 critères de différenciation :

ü réduction du tellurite

ü protéolyse des protéines du jaune d'œuf

ü hydrolyse par une lécithinase des lécithines du jaune d'œuf

Þ  en tellure noir

Þ halo clair autour de la colonie

Þ liseré blanc opaque autour de la colonie

                Le milieu présenté en boite de Pétri est destiné à un isolement.

Le milieu présenté en tube est à beurrer avec une culture pure car il entre dans la galerie d’identification des coques gram + de culture facile.

                C’est un milieu sélectif des streptocoques peu exigeants.

Il contient 2 inhibiteurs :

                - la bile de bœuf

                - l’azide de sodium

                Isolement

                18 à 24 h à 37°C

                Hémolyse b : zone claire d’hémolyse totale de diamètre 3-4 mm  entourant les colonies.

                Hémolyse a : zone floue et granuleuse, verdâtre de 1 à 2 mm de diamètre

                Isolement

                Filtration

                Les Entérocoques donnent des colonies de taille moyenne, roses ou rouges.

                Les Bacillus peuvent pousser et donner le même aspect de colonies, mais de taille plus importante.

            Ensemencer la surface du milieu au moyen de l'anse.

                Incuber durant 24 heures à 37°C, voire même de préférence à 42°C (l'incubation à 42°C permet un isolement spécifique de P.aeruginosa).

- pyoverdine

- pyocyanine

ü Milieu bleu : pyocyanine

ü Milieu jaune- vert : pyoverdine

                - Transférer l'échantillon à analyser sur le milieu.

                - Etaler l'inoculum en surface à l'aide d'un étaleur en verre stérile.

                - Incuber à 20 - 25°C de 3 à 5 jours.

            ü L'ajout de triphényltétrazolium à raison de 100 mg par litre en fait un milieu de différenciation pour les Candida.

- Transférer l'échantillon à analyser sur le milieu.

- Etaler l'inoculum en surface à l'aide d'un étaleur en verre stérile.

                - Incuber à 20 - 25°C de 3 à 5 jours.

            Isolement.

                ü les sels biliaires, le cristal violet (inhibiteur des Gram+)                ü irgasan, cefsulodine et la novobiocine.(inhibiteur des gram - sauf Yersinia enterocolitica)

ü le mannitol

Les Yersinia cultivent sous forme de petites colonies de 1 mm de diamètre, à centre rouge entourées d'une zone translucide

Colonies rouges : mannitol +

Colonies jaunes : mannitol -.

Faire une strie centrale à la surface du milieu.

                Incuber 24H à 7jours à la température désirée.

            Ensemencer par une strie à la surface du milieu.

                Incuber un à huit jours à la température désirée.

           Hydrolyse mise en évidence par l’ajout d’une solution iodée :

- une coloration bleu-rouge due à l’amidon, montre qu’il n’a pas été hydrolysé

-  la disparition de cette coloration montre son hydrolyse.

            Faire une strie à la surface du milieu, ou éventuellement des touches.

                Incuber pendant 24 h ou plus à 37°C.

            Contient deux inhibiteurs de la flore Gram⁺ :

- le désoxycholate de sodium

                - et le cristal violet

            Les colonies de bactéries lactose + sont jaunes.

                Celles de bactéries lactose – sont bleues.

               Isolement

               L’incubation se fait en anaérobiose.

                - les anaérobies sulfito-réducteurs : à 37°C

                - Clostridium perfringens à 46°C

                Colonies rouges ® colonies sulfito-réductrices

Pas de photos

                - Colonies jaunes (Vibrions saccharose +)

                - Colonies vertes (Vibrions saccharose -)

                - Petites colonies jaunes

                - Petites colonies vertes

                Colonies à centre noir : colonies H₂S +.

            Percer la gélose de trous.

            Inoculer avec quelques gouttes d'un bouillon creur­cervelle ensemencé auparavant et bouilli 10 minutes.

                Incuber 4 heures à 37 °C

               2 inhibiteurs des bactéries Gram⁺ à faible concentration :

                - le désoxycholate (sels biliaires)

                - et le citrate de sodium.

               Colonies rouges ® bactéries lactose⁺ Þ coliformes

                Colonies incolores ® bactéries lactose^-

selon le cas :

                 - isolement

                - ensemencement en nappe avec inoculum

Pas de photos

            - le TTC qui montre le pouvoir réducteur des bactéries 

                le lactose dont l’utilisation est révélée par le virage du bleu de bromothymol

                - colonie rose-rouge : réduction du TTC

                - colonie jaune : absence de réduction du TTC

                - halo bleu-vert : lactose –

                - halo jaune : lactose +

                E. coli et Enterobacter aerogenes donnent des colonies jaunes

               Les autres coliformes donnent des colonies rouges.

                Si il y a croissance alors présence de la souche Bacillus cereus : colonie

                   - roses rouges (mannitol -)

- halo blanchâtre au centre de la colonie (lécithinase +)